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為你的轉染實驗保駕護航

細胞轉染是指將外源分子如DNA,RNA等導入真核細胞的技術。隨著分子生物學和細胞生物學研究的不斷發展,轉染已經成為研究和控制真核細胞基因功能的常規工具。在研究基因功能、調控基因表達、突變分析和蛋白質生產等生物學試驗中,其應用越來越廣泛。那么,羅氏應用科學部都有哪些轉染試劑,其優勢都有哪些?本期帶大家走進羅氏轉染試劑的多彩世界。

 

 X-tremeGENE 9 DNA 轉染試劑   

簡介:

X-tremeGENE 9 DNA轉染試劑是脂質和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經0.2 μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。

優勢:

1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數據。

2.操作簡便、節省時間,只需對X-tremeGENE 9 DNA轉染試劑進行簡單稀釋,再與質粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。

3.對于常用細胞無需進行費時費力的優化工作。

 

 X-tremeGENE HP DNA 轉染試劑   

簡介:

X-tremeGENE HP DNA轉染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉染試劑,兼容含血清或不含血清的培養基,可用于轉染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉染細胞系。

優勢:

1.簡單易用的多組分混合試劑,無動物源性成分,室溫穩定。

2.高轉染效率,對于原代細胞和使用其它試劑難轉染的腫瘤細胞系有高轉染效率。

3.使用細胞毒性低的試劑,結果相關性好。

圖2. X-tremeGENE HP高效低毒的轉染性能。通過X-tremeGENE HP和脂質體轉染方法將GFP表達質粒轉染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉染的細胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質體轉染方法的細胞毒性遠高于X-tremeGENE HP,導致存活細胞量減少(圖片來源于網絡)。

圖3. X-tremeGENE HP對難轉細胞系的轉染效果優于脂質體轉染方法。應用GFP編碼的質粒對人/鼠間充質干細胞進行轉染。XHP 3:1表示用X-tremeGENE HP及相應的轉染試劑(μl): 質粒DNA (μg)比例進行轉染(圖片來源于網絡)。

 

 X-tremeGENE siRNA 轉染試劑   

簡介:

X-tremeGENE siRNA轉染試劑一種優化的多組分低毒試劑,能夠向多種常用細胞系有效遞送小干擾RNA(siRNA)作用于序列特異的目標基因,引發基因表達下調或基因沉默。

優勢:

1.在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%。

2.高靈活應用, 同一試劑可用于siRNA和質粒共轉染的基因沉默實驗。

3.細胞毒性低,結果相關性好,確保所觀察到的細胞效應是由轉染的siRNA而非轉染過程本身介導。

4.兼容含血清或不含血清的培養基,轉染前后均無需換液(如無血清培養基)。

圖4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗。根據各試劑說明書建議的操作流程,或標準實驗方法,將100nM HPRT特異性siRNA轉染至4種細胞。 通過LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評估基因沉默效率。結果顯示X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent在四種細胞中轉染后基因沉默表現均表現優異。

 

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